2020年
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CRISPR/Cas9 system by transfecting Cas9-expressing Plasmodium berghei with
linear donor template. Commun Biol. 2020 Aug 5;3(1):426. doi:
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Improvement of CRISPR/Cas9 system by transfecting Cas9-expressing Plasmodium berghei with linear donor template
Commun Biol. 2020 Aug 5;3(1):426.
CRISPR/Cas9 systemは遺伝子操作の有用なツールとして多くの生物で利用されています。しかし、マラリア原虫では未だ効率の良いCRISPR/Cas9 systemは開発されていませんでした。私たちはCas9 nucleaseをゲノム に組み込んだマラリア原虫を作製し、これにsingle guide RNAと直鎖状の鋳型DNAを導入することで、100%の効率で遺伝子操作できる方法を開発しました（図1）。この効率は従来のほぼ10倍以上に達します。さらにこの手法にテロメア配列を応用することでゲノムを自在に切断できる方法も開発しました（図2）。以上のことより本手法は遺伝子レベルからゲノムレベルまで幅広い応用が可能であることが示されました。
図１：Cas9発現マラリア原虫を使った遺伝子操作の原理
図２：テロメア配列を使ったゲノム切断
